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Tra l'osservazione dal vero delle espressioni emotive e la loro rappresentazione artistica, Leonardo inserisce una ricerca di tipo scientifico: studia la fisiognomica, cioè il rapporto tra carattere permanente e aspetto del volto. Si dedica in particolare allo studio dei muscoli responsabili delle espressioni emotive e delle loro ripercussioni cardiovascolari.
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